上傳時間：2026/7/30 8:53:23 來源：易買儀器網(wǎng) 點擊：15
1．所需試劑：
a．硫酸（比重1.84）
b．NaOH溶液：400gNaOH溶于1000ml的水中
c：2％ H3BO3
d．0.1N HCI
e．催化劑：硒粉或硒片+無水硫酸鈉（1：1000）
f．指示劑：0.1％甲基紅+0.5％溴甲酚綠（1：1）
g．蒸餾水
2．樣品消化：
樣品經(jīng)粉碎后通過40-60目篩，稱取0.5—1g（視含氮量而增減）放入已洗滌烘干的消化管中，并加催化劑硒片1片和10ml硫酸。
將消化管分別放入消化架各孔中，然后將其置于消化爐上。在排污管的與消化管套接的口上套上密封圈，然后將排污管與位于消化爐上的消化管的各口子對應(yīng)套好，并使其不漏氣。再在排污管的彎嘴上套上橡膠管，橡膠管的另一端套在白色的抽氣三通的中間的水嘴上，抽氣三通的進水口用橡膠管連接到水龍頭上，抽氣三通的出水口通過橡膠管引入水池的下水道中（見圖2），并打開水龍頭，使水量適中，以既能抽掉消化過程中所產(chǎn)生的廢氣，又能節(jié)約用水為好。打開消化爐的電源開關(guān)，有溫控的消化爐需先設(shè)定好溫度，無溫控的消化爐應(yīng)先將電壓調(diào)至最大，過20分鐘左右再將電壓調(diào)到200V左右。40分鐘—1小時左右待樣品變色即消化完畢。
3．蒸餾前的準(zhǔn)備工作：
⑴．在蒸餾器機箱右側(cè)的對應(yīng)水嘴上接上相應(yīng)的橡膠管：即在標(biāo)有NaOH的水嘴上套上橡膠管，橡膠管的另一端放入盛有NaOH溶液的容器中。在標(biāo)有H2O的水嘴上套上橡膠管，橡膠管的另一端放入盛有蒸餾水的容器中。在標(biāo)有冷卻水的水嘴上用橡膠管連接到水龍頭上。在標(biāo)有排水的水嘴上套上橡膠管，橡膠管的另一端放入水斗中。在標(biāo)有出水的水嘴上套上橡膠管，橡膠管的另一端也放入水斗中。打開水龍頭，使水量適中。
⑵．在250ml的三角接收瓶中加入50ml 2％的H3BO3和2—3滴混合指示劑，然后將接收瓶套在接收管上后置于接收瓶托架上，調(diào)節(jié)托架的高低使接收液管口浸沒在H3BO3液體中。
⑶．將電源線一端插入蒸餾器機箱左側(cè)下方對應(yīng)的插孔中，另一端插入電源插座中，暫時先不要打開電源開關(guān)。
儀器所用的時間控制器采用4位數(shù)碼管顯示，在數(shù)碼管的下面有一排5個小框，其中中間的那個小框是秒（S）、分（M）、時（H）調(diào)節(jié)框，其余的是數(shù)字設(shè)定框。在調(diào)節(jié)框左邊的2位數(shù)字是整數(shù)部分。每個小框的上面和下面都有相應(yīng)的調(diào)節(jié)鍵，上面為“減”調(diào)節(jié)鍵，下面為“加”調(diào)節(jié)鍵?？筛鶕?jù)自己的不同需要來進行設(shè)定。
設(shè)定蒸餾時間、加水時間和加堿時間(加水量和加堿量是通過時間控制器控制加水泵和加堿泵的工作時間長短來實現(xiàn)的)：
a. 蒸餾時間設(shè)定——以收集液達到150ml（150ml收集液是指不包括50ml的硼酸溶
液的量）計，如果你是在冷水狀態(tài)下（當(dāng)天第一次使用，此時蒸發(fā)爐內(nèi)的水是冷的，此稱為冷水狀態(tài)，而從第二次開始則為熱水狀態(tài)）使用，可設(shè)定蒸餾時間為14分鐘左右；如果是在熱水狀態(tài)下，可設(shè)定蒸餾時間為10分30秒~11分鐘左右。
b. 加水時間設(shè)定——如以加水量10ml計，一般只要設(shè)定1.5~2秒左右。
c. 加堿時間設(shè)定——如以加堿量50ml計，一般只要設(shè)定3.5~4秒左右。
這里需要說明的是，3個時間的設(shè)定必須在電源開關(guān)不打開的狀態(tài)下進行，如果你是在
電源開關(guān)打開的狀態(tài)下進行設(shè)定，則在設(shè)定好以后必須先將電源開關(guān)關(guān)閉，然后再打開，系統(tǒng)才予以認(rèn)可。以上列出的蒸餾時間、加水時間、加堿時間都是我們做實驗得出的結(jié)果，不一定和用戶的實際情況一致，僅供用戶在使用時參考。
設(shè)置好的各個時間參數(shù)在關(guān)閉電源開關(guān)后不會丟失。
4. 蒸餾：
以上工作全部完成后，按下工作鍵后儀器將按以下順序進行工作：先向蒸發(fā)爐中注水，待蒸發(fā)爐中水位到達工作水位后啟動向消化管中加水，加水完成后啟動向消化管中加堿，加堿完成后啟動蒸餾計時，當(dāng)蒸餾時間到，儀器自動切斷蒸發(fā)爐加熱電源，并啟動蜂鳴器報警，提示用戶本次樣品的蒸餾已經(jīng)完成，可以取下三角接收瓶進行滴定。
5. 滴定和計算：
取下三角接收瓶，用0.1N 濃度的HCI來滴定接收瓶內(nèi)的接收液，觀察液體顏色由綠色變?yōu)榈仙珪r為止，記下消耗的HCI的量，按下式計算蛋白質(zhì)含量：
蛋白質(zhì)含量％=（V—V0）N×0.014×A×100/ W
式中：V——消耗HCL的ml數(shù)；
V0——空白試驗時消耗的HCI的ml數(shù)；
N——HCL的當(dāng)量濃度；
0.014——1ml HCI的克當(dāng)量；
A——樣品中含氮量與蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)換系數(shù)；
W——樣品重量g。
注：空白測定——用0.1克糖代替樣品或不加樣品做空白測定。
6. 儀器清洗：
如果你在做完試樣后不需再做其他的試樣，那么請你在關(guān)機前對蒸餾器進行清洗，請先準(zhǔn)備好1500ml以上的溫度在40℃—50℃左右的水（40℃—50℃左右的水對清洗堿效果最好）。在蒸餾器上裝消化管的位置上裝上清洗管（清洗管的外形和消化管一樣，只是清洗管上多了一個出水的水嘴），在清洗管的水嘴上套上橡膠管，橡膠管的另一端放入下水道。將原先放在堿容器內(nèi)的橡膠管放入盛有1500ml以上水的容器內(nèi)，然后按清洗鍵，清洗時間應(yīng)不少于1分鐘。
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